關于細胞論文范文資料,與逐淤化痰湯對腦出血大鼠細胞凋亡Bcl-2蛋白表達的影響相關專升本畢業論文開題報告

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【中圖分類號】R-332【文獻標識碼】A【文章編號】1005-2720(2009)04-0252-02

【摘 要 】目的：探討逐淤化痰湯對腦出血大鼠血腫周圍腦組織細胞凋亡及Bcl-2蛋白表達的影響.方法：90只SD大鼠隨機分為逐淤化痰湯、腦出血和假手術組,各30只.用尾狀核注射自體血法建立腦出血模型；在不同時間點檢測神經細胞凋亡數及Bcl-2蛋白表達的變化.結果：在相同時間點逐淤化痰湯組細胞凋亡數低于腦出血組,而Bcl-2蛋白表達水平高于腦出血組.結論：逐淤化痰湯可抑制出血后神經細胞凋亡,此作用可能與其上調Bcl-2蛋白表達水平有關.

如何寫細胞碩士小論文
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【關 鍵 詞 】逐淤化痰湯；腦出血；細胞凋亡；Bcl-2蛋白

腦出血(ICH)是神經系統常見病和多發病.研究表明,細胞凋亡機制參與腦出血后繼發性神經細胞損傷[1].逐淤化痰藥物在腦出血的治療中仍然發揮著重要作用,逐淤化痰湯(Zhuyuhuatan oral liquid)經臨床證實對治療腦出血有確切療效,但多用于恢復期.本實驗觀察大鼠腦出血急性期應用逐淤化痰湯后血腫周圍腦組織內細胞凋亡及Bcl-2(B細胞淋巴瘤/白血病-2)蛋白的表達情況,為逐淤化痰湯治療急性期腦出血提供理論依據.

1.材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物：SD大鼠90只,體重250~300g(遼寧醫學院動物中心).

1.1.2 試劑和儀器：逐淤化痰湯(錦州醫藥公司),Bcl-2測定試劑盒(購自武漢博士德公司),Tunel試劑盒(購自武漢博士德公司),立體定位儀(美國STOELTING公司),微量進樣器(上海安亨微量進樣器廠).

1.2 方法：隨機分為假手術、腦出血、逐淤化痰湯組,每組30只；按術后1、2、3、5、7d,各6只.造模后6h開始按每次1g/kg,2次/d,灌喂給藥,腦出血組造模后灌喂等量生理鹽水.假手術組除不注血外,其余同腦出血組.參照Xue[2]方法制備腦出血模型.立體定位儀引導下向尾狀核(前囟后0.2mm,矢狀縫向右旁開3.0mm,深度6.0mm)注入自體尾血50μl；以25μl/min速度2min注入完畢；留針10min.假手術組除不注血外,余操作同腦出血組.

1.3 指標測定：在高倍物鏡下,每張切片中隨機選取出血灶邊緣相互不重疊的5個視野,計數高倍(400×)鏡下細胞凋亡、Bcl-2蛋白陽性細胞數.

1.3.1 細胞凋亡檢測：采用細胞凋亡Tunel法,具体操作步驟按試劑盒說明書進行,凋亡細胞為細胞核呈棕 著色.

1.3.2 Bcl-2蛋白檢測：采用免疫組化SP法,具体操作步驟按試劑盒說明書進行,鼠抗Bcl-2多克隆抗體工作濃度為1∶100.Bcl-2蛋白以細胞胞質呈棕 著色為陽性細胞.

1.3.3 數據处理：實驗數據用(x±s)表示,組間比較均采用方差分析.

2.結果

2.1 細胞凋亡：假手術組凋亡細胞在各時間點均有少量表達,而ICH組第1天開始明顯增多,第2天达到高峰,之后逐渐減少,第7天仍有凋亡細胞存在,逐淤化痰湯組與ICH組比較凋亡細胞數各時間點均有顯著降低(P<0.05或P<0.01).

2.2 Bcl-2蛋白表達的變化：在假手術組Bcl-2蛋白表達陽性細胞數較低；ICH組與假手術組相比,Bcl-2蛋白陽性細胞數均明顯增加(P<0.05)；與ICH組比較,逐淤化痰湯組Bcl-2蛋白陽性細胞數顯著增加(P<0.05).見表1.

3.討論

有研究證實腦出血后腦血流量降至正常的25%~50%,并在出血后24~48h內基本恢復正常.這種相對溫和的缺血尚不足以引起腦梗死,但卻易導致腦細胞凋亡[3].可见細胞凋亡是不同于細胞壞死的一種細胞死亡形式,其過程受一系列相關基因的調控.Bcl-2家族在凋亡調控基因中位于重要地位,Bcl-2蛋白是其中一種重要的膜合蛋白,為中樞神經系統主要的神經保護性蛋白,通過阻止細胞凋亡的早期環節而發揮作用,它的表達是抑制細胞凋亡的關鍵步驟；腦出血后細胞凋亡的高峰在48~72h,這種高峰與臨床上病情的繼發

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綜上所述,逐淤化痰湯具有上調腦出血后Bcl-2蛋白,抑制神經細胞凋亡的作用.本實驗結論為臨床腦出血急性期應用活血化淤藥提供實驗依據.

【參考文獻】

[1] Gong C,Boulis N,Qian J,et al.Intracerebral hemorrhage in duced neur- onal death[J].Eurosurgery,2001,48：875~883.

[2] Xue M,Del BigioM R.Intracerebral in jection of autologous whole blo-od in rats：time course of inflammation and cell death[J].Neuroscience Le-tters,2000,283：230.

[3] 林靚.抵擋湯對實驗性腦出血大鼠腦細胞凋亡的影響[J].甘肅中醫,2005,18(3)：1.

[收稿 2008-12-10]

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